感受态细胞有何特点?如何保证它的质量?
感受态细胞有何特点?如何保证它的质量?
日期:2008-11-18 21:09:37 人气:1
特点:处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态
CaCl2法:
操作:
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成复合物。
2.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激,外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。
3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
意义: