构建质粒载体时需考虑哪些特性

日期:2016-12-05 18:15:19 人气:1

构建质粒载体时需考虑哪些特性

  用作克隆载体的理想质粒一般具备下述特点:   ①具有松驰型复制子(如ColE1),复制子(replicon)是质粒自我增殖所必不可少的基本条件,并可协助维持使每个细胞含有一定数量的质粒拷贝。   ②在复制子外存在几个单一的酶切位点(或多克隆位点),以便目的DNA片段插入。   ③具有插入失活的筛选标记,理想的质粒载体应具有两种抗菌素抗性标志,如氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr)等,以便从平板中直接筛选阳性重组子。   ④分子量相对较小和较高的拷贝数。此外,质粒的缺点是容
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