如何预测和鉴定miRNA的靶基因

有很多生物软件可以预测某个miRNA的靶基因，如TargetScan，mirBase，PicTar，结合miRNA芯片筛选。确定靶蛋白后，通过overexpression或antisense改变该miRNA的表达量，QRT-PCR及Western Blot检测相应蛋白含量的变化;将预测靶蛋白的启动子转载到pGL3载体，转染细胞并检测luciferase的变化倍数;最后通过IP证明两者间的结合